熒光生物顯微鏡是由倒置顯微鏡和落射熒光顯微鏡組成,儀器配有長工作距離平場消色差物鏡、大視野目鏡。倒置觀察時配置長工作距離平場相襯物鏡和帶相襯裝置的特長工作距離聚光鏡,熒光觀察時可進(jìn)行激發(fā)濾色片組切換。
該儀器具有成像清晰,視場廣闊,結(jié)構(gòu)緊湊,造型美觀,操作舒適等特點,主要適用于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)活體細(xì)胞和組織、流質(zhì)、沉淀物等顯微觀察,也可應(yīng)用于未染色透明活體和熒光切片的熒光顯微觀察。是生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)等研究工作的理想儀器。可供科研院所、醫(yī)療、防疫和農(nóng)牧等部門使用。
配置特點:
配置熒光裝置,帶有四組熒光濾光片組;
配置相襯裝置,包括特長工作距離相襯聚光鏡;
配置長工作距離平場消色差物鏡,視場平坦而且清晰;
兩路光路輸出,一路用于觀察,一路用于連接攝像裝置;
采用帶有刻度標(biāo)尺的雙層機(jī)械載物臺,同軸縱橫向調(diào)節(jié)手輪,操作更靈便;
采用粗微動同軸調(diào)焦機(jī)構(gòu),粗動松緊可調(diào),帶鎖緊和限位裝置,載物臺的移動機(jī)構(gòu)可拆卸。
使用方法與注意事項
使用方法:
(1)將物料板放在舞臺上。
(2)打開調(diào)節(jié)器熒光顯微鏡。然后按下啟動一套UV燈不能接近15分鐘內(nèi)點燃,后收盤不能重新啟動3分鐘。
(3)將激勵濾波器轉(zhuǎn)換為V,將分色器調(diào)整為V,選擇495或475nm阻塞濾波器。
(4)使用uvfl40、uvfl100螢光鏡檢查。
(5)將非熒光油加入到載玻片上,首先使用40X,然后用100X聚焦檢測熒光。
(7)由于在由隨時間推移的UV熒光增加照射熒光物質(zhì)逐漸減弱,因此應(yīng)不斷變化的視野檢查。
(8)紫外FL10或紫外FL20也可用作低倍材料(使用低倍顯微鏡時不加熒光油)。
熒光圖像的記錄方法:
觀察到的熒光圖像具有形態(tài)特征,具有熒光顏色和亮度。在判斷結(jié)果時,必須結(jié)合起來作出的判斷。結(jié)果是根據(jù)主觀指標(biāo),即工人的眼睛來記錄的。作為一般的定性觀測,它基本上是的。隨著科技的發(fā)展,客觀指標(biāo)被用來記錄判斷結(jié)果,如使用細(xì)胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但是,這些文書所記錄的結(jié)果也必須與主觀判斷相結(jié)合。
熒光生物顯微鏡攝影對于記錄熒光圖像是非常必要的。由于熒光容易褪色和減弱,因此有必要對實時照相的結(jié)果進(jìn)行記錄。該方法與普通顯微攝影方法基本相同。只需使用高速光敏膜,如ASA 200或以上或24。上面。由于紫外光對熒光的猝滅效應(yīng)很大,如熒光標(biāo)記物FITC等,在紫外光照射30s時,熒光亮度下降了50%,因此曝光速度太慢,無法捕捉到熒光圖像。一般研究型產(chǎn)品有半自動或全自動顯微攝影系統(tǒng).
注意事項:
(1)嚴(yán)格按照操作說明書的要求制造的熒光顯微鏡,不改變該程序。
(2)檢查應(yīng)在暗室進(jìn)行。進(jìn)入暗室后,接通電源,點燃超高壓汞燈5-15分鐘。當(dāng)光源發(fā)出強(qiáng)光并穩(wěn)定下來時,眼睛有效適應(yīng)暗室,然后開始觀察標(biāo)本。
(3)為防止紫外線對眼睛造成損害,調(diào)節(jié)光源時戴防護(hù)眼鏡。
(4)每次檢查時間為1~2h,超過90min,超高壓汞燈的發(fā)光強(qiáng)度逐漸降低,熒光降低;紫外線照射3~5分鐘后熒光降低。因此,不超過2~3h。
(5)檢查應(yīng)聚焦在試樣上,為了節(jié)省時間,保護(hù)光源。天熱時,冷卻風(fēng)扇應(yīng)添加,更換燈泡應(yīng)該開始新的記錄時間。后燈可以點亮,然后熄滅是,受燈充分冷卻。每日數(shù)次,以避免火源。
(6)染色后,熒光會隨著時間逐漸減弱。當(dāng)試樣在4℃下存放在聚乙烯塑料袋中時,可延遲熒光衰減時間,防止密封劑蒸發(fā)。
(7)熒光亮度的確定標(biāo)準(zhǔn):一般分為四個級別,即"1"-NO或可見弱熒光。"++"-只能看到明顯可見的熒光。"(+)+"-可見且明亮。